时隔3年后，韩春雨发布新闻最新科研成果论文

时隔3年，曾处于舆论旋涡的韩初夏官方网站了一项简介研究课题成果。近日，韩初夏在亦同刻本网站BioRxiv上刊登了一篇关于基因编辑的新篇名：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。篇名共5名原作者，分别为为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，兼职各单位均为河北生物学科技大学基因编辑研究课题中所心。其中所，韩初夏为通讯原作者。据了解，论文中所引用的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR复合物的反应器心成分，它通过紧密结合特定的花茎环状区域实质上处理pre-crRNA，称作之为 CasE Binding S，简写为CBS。CasE保守派His20参与催化活着性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则无法控制了催化活着性，但即使如此与其靶标紧密紧密结合。在该研究课题中所，通过将 split 萤光与dCasE的N故又称作和C-末故又称作（ΔHis20）融合，构筑了活着体RNA方法VN-dCasE-VC。该子系统仅在存有靶RNA时才发出萤光，从而大幅提高信噪比。在活着细胞会中所开展图形学的RNA，不需要特定的亚细胞会常见于。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T细胞会中所的多方面传达和均匀常见于证明CasE和dCasE适合于活着细胞会中所的RNA可用。为了测试CasE在灵长类动物细胞会中所传达时究竟不具强活着性，原作者构筑了“重新启动”报告基因细胞核CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中所的GFP mRNA和CasE紧密结合位点（CBS）组成。当CasE被引入子系统时，GFP传达高水平急剧下降。同时，为了进一步测试CasE活着性，原作者还构筑了“开启”报告基因细胞核RED-16×CBS-Lin28-C1，其中所CBS插入RED乙烯基因的3′-UTR区和Lin28的上游。Lin28是RNA反应器保存频谱，在其3′-UTR中所不具lin28频谱的RED乙烯mRNA大部分只能翻译成抗原质。CBS-CasE依靠限制性割断lin28频谱并从反应器获释靶mRNA用于翻译（平面图1E和平面图1F）。这些证明CasE可以紧密结合并接合灵长类动物细胞会中所的CBS。另外，为了将dCasE-CBS相互作用设计到RNA子系统中所，原作者通过将split-FP5-7与dCasE抗原紧密结合。挖掘出一个修改版，即VN-dCasE-VC没法发出萤光，这可能会是由于不正确的螺旋或无可避免状态，但是当与靶RNA（CBS）紧密结合时，可以在萤光显微镜下清楚地捕获萤光频谱，即使VN-dCasE-VC传达细胞核的转染剂量非常较差。接下来，原作者用到VN-dCasE-VC子系统灵长类动物细胞会中所过传达的β-肌动抗原（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC子系统在细胞会质中所说明了出强萤光。此外还观察到，向靶mRNA添加更为多CBS可有所改善频谱，萤光更为清晰，因此，可以通过降低CBS的数量来样品较差丰度的mRNA。总的来说，韩初夏制作团队发明家了一种取而代之RNA方法，将其重新命名为VN-dCasE-VC，该子系统并不需要活着细胞会中所没法背景的特定RNA，通过萤光将其图形学。以外已有两种活着细胞会RNA显像方法，一种是MS2，一种是Cas13a，韩初夏制作团队联合开发的dCasE子系统，显像效果由于MS2，而且，dCasE抗原的相对分子质量为22kDa，数倍小于Cas13a的130kDa，dCasE的小相对分子质量更为容易投递至细胞会内，因此更为适合用于活着细胞会的RNA。一位接近韩初夏的人士透露：“这篇篇名是先前韩初夏兼职的延续，意在都是联合开发基因编辑方法。”不过，值得注意的是，该研究课题以外刊登于亦同刻本网站，尚私自过几位审定，已对，有科研人士指出，先于在私自几位审定的亦同刻本上，是为了授予先于权。“韩初夏下一步还会投正式出版物的。”前述人士推测。不知道此次取而代之研究课题成果究竟会再次给韩初夏造成了关注，2016年5同年，《大自然—生物学技术联合开发》刊登韩初夏制作团队取而代之基因编辑技术联合开发NgAgo，被媒体以“托坐冷板凳、十年憋大招”的主人翁原形炒作而走红，此后半年，韩初夏个人及其所在大学陆续授予各类名誉和大量经费不足资助，但亦有国内多名基因编辑应用领域地质学家实名发宣称作实验结果难以以此类推，猜测实验结果的真实性。2017年8同年，《大自然—生物学技术联合开发》刊登二本书《是该数据好像的时候了》光明日报，宣布撤回韩初夏制作团队于2016年5同年2日刊登在该出版物的论文。2018年9同年，河北生物学科技大学公告，韩初夏制作团队不存有主观造假。但依据有关规章，终止韩初夏所授予的荣誉称作号，中所止韩初夏制作团队分担的国家自然科学基金并收回科研经费不足。韩初夏制作团队辩解称作，分析方法存有缺陷、研究课题过程存有着不严谨的原因。有各行各业人士表示：“这波之后，NgAgo这个研究课题朝向在中所国动手得较慢。韩初夏他们的兼职推展起来也来得困难，连的学生也没法新招。”